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      綿羊促卵泡素(FSH)ELISA檢測(cè)試劑盒 使用說(shuō)明書(shū)

      發(fā)布時(shí)間:2024-10-07
      本試劑盒只能用于科學(xué)研究,不得用于醫(yī)學(xué)診斷
      綿羊促卵泡素(fsh)elisa檢測(cè)試劑盒
      使用說(shuō)明書(shū)
      檢測(cè)原理
      試劑盒采用雙抗體夾心法酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(elisa)。往預(yù)先包被綿羊促卵泡素(fsh)捕獲抗體的包被微孔中,依次加入標(biāo)本、標(biāo)準(zhǔn)品、hrp標(biāo)記的檢測(cè)抗體,經(jīng)過(guò)溫育并*洗滌。用底物tmb顯色,tmb在過(guò)氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成終的黃色。顏色的深淺和樣品中的綿羊促卵泡素(fsh)呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm 波長(zhǎng)下測(cè)定吸光度(od 值),計(jì)算樣品濃度。
      樣品收集、處理及保存方法
      1. 血清:使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管,操作過(guò)程中避免任何細(xì)胞刺激,收集血液后,3000轉(zhuǎn)離心10分鐘將血清和紅細(xì)胞迅速小心地分離。
      2. 血漿:edta、檸檬酸鹽或肝素抗凝。3000轉(zhuǎn)離心30分鐘取上清。
      3. 細(xì)胞上清液:3000轉(zhuǎn)離心10分鐘去除顆粒和聚合物。
      4. 組織勻漿:將組織加入適量生理鹽水搗碎。3000轉(zhuǎn)離心10分鐘取上清。
      5. 保存:如果樣本收集后不及時(shí)檢測(cè),請(qǐng)按一次用量分裝,凍存于-20℃,避免反復(fù)凍融,在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。
      自備物品
      酶標(biāo)儀(450nm)高精度加樣器及槍頭:0.5-10ul、2-20ul、20-200ul、200-1000ul37℃恒溫箱操作注意事項(xiàng)
      試劑盒保存在2-8℃,使用前室溫平衡20分鐘。從冰箱取出的濃縮洗滌液會(huì)有結(jié)晶,這屬于正常現(xiàn)象,水浴加熱使結(jié)晶*溶解后再使用。實(shí)驗(yàn)中不用的板條應(yīng)立即放回自封袋中,密封(低溫干燥)保存。預(yù)處理后的樣本無(wú)需稀釋,直接取10μl加樣即可。嚴(yán)格按照說(shuō)明書(shū)中標(biāo)明的時(shí)間、加液量及順序進(jìn)行溫育操作。所有液體組分使用前充分搖勻。試劑盒組成
      名稱
      96孔配置
      48孔配置
      備注
      微孔酶標(biāo)板
      12孔×8條
      12孔×4條
      無(wú)
      標(biāo)準(zhǔn)品
      0.3ml
      0.3ml
      無(wú)
      *
      6ml
      3ml
      無(wú)
      檢測(cè)抗體-hrp
      10ml
      5ml
      無(wú)
      20×洗滌緩沖液
      25ml
      15ml
      按說(shuō)明書(shū)進(jìn)行稀釋
      底物a
      6ml
      3ml
      無(wú)
      底物b
      6ml
      3ml
      無(wú)
      終止液
      6ml
      3ml
      無(wú)
      封板膜
      2張
      2張
      無(wú)
      說(shuō)明書(shū)
      1份
      1份
      無(wú)
      自封袋
      1個(gè)
      1個(gè)
      無(wú)
      注:標(biāo)準(zhǔn)品濃度依次為:16、8、4、2、1、0 miu/ml.
      試劑的準(zhǔn)備
      20×洗滌緩沖液的稀釋:蒸餾水按1:20稀釋,即1份的20×洗滌緩沖液加19份的蒸餾水。
      洗板方法
      手工洗板:甩盡孔內(nèi)液體,每孔加滿洗滌液,靜置1min后甩盡孔內(nèi)液體,在吸水紙上拍干,如此洗板5次。自動(dòng)洗板機(jī):每孔注入洗液350μl,浸泡1min,洗板5次。操作步驟
      從室溫平衡20min后的鋁箔袋中取出所需板條,剩余板條用自封袋密封放回4℃。設(shè)置標(biāo)準(zhǔn)品孔和樣本孔,標(biāo)準(zhǔn)品孔各加不同濃度的標(biāo)準(zhǔn)品50μl;待測(cè)樣本孔先加待測(cè)樣本10μl,再加*40μl;隨后標(biāo)準(zhǔn)品孔和樣本孔中每孔加入辣根過(guò)氧化物酶(hrp)標(biāo)記的檢測(cè)抗體100μl,用封板膜封住反應(yīng)孔,37℃水浴鍋或恒溫箱溫育60min。棄去液體,吸水紙上拍干,每孔加滿洗滌液,靜置1min,甩去洗滌液,吸水紙上拍干,如此重復(fù)洗板5次(也可用洗板機(jī)洗板)。每孔加入底物a、b各50μl,37℃避光孵育15min。每孔加入終止液50μl,15min內(nèi),在450nm波長(zhǎng)處測(cè)定各孔的od值。結(jié)果判斷
      繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線:在excel工作表中,以標(biāo)準(zhǔn)品濃度作橫坐標(biāo),對(duì)應(yīng)od值作縱坐標(biāo),繪制出標(biāo)準(zhǔn)品線性回歸曲線,按曲線方程計(jì)算各樣本濃度值。
      試劑盒性能
      準(zhǔn)確性:標(biāo)準(zhǔn)品線性回歸與預(yù)期濃度相關(guān)系數(shù)r值,大于等于0.9900。靈敏度:低檢測(cè)濃度小于0.1miu/ml。特異性:不與其它可溶性結(jié)構(gòu)類似物交叉反應(yīng)。重復(fù)性:板內(nèi)變異系數(shù)小于10%、板間變異系數(shù)小于15%。貯藏:2-8℃,避光防潮保存。有效期:6個(gè)月免責(zé)聲明
      試劑盒僅供研究使用,不得用于臨床實(shí)驗(yàn)或人體實(shí)驗(yàn),否則所產(chǎn)生的一切后果,由實(shí)驗(yàn)者承擔(dān),本公司概不負(fù)責(zé)。嚴(yán)格按照說(shuō)明書(shū)操作,實(shí)驗(yàn)者違反說(shuō)明書(shū)操作,后果由實(shí)驗(yàn)者承擔(dān)。
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