丁香 別名:公丁香(花蕾)、母丁香(果實)。為桃金娘科植物丁香eugenia caryophyllata thunb.的干燥花蕾及果實。原產(chǎn)于非洲摩洛哥,現(xiàn)我國廣東亦有種植。丁香花蕾含揮發(fā)油(即丁香油)14%~20%,油中主要成分*,約78%~95%,乙酰*約3%及少量的丁香烯、甲基正戊酮、甲基正庚酮、香莢蘭醛等。另尚含*、鞣質(zhì)、脂肪油及蠟。果實含丁香油2%~9%。
*(eugenol) 分子式c10h12o2,分子量164.20。無色或蒼黃色液體,bp.225℃。幾不溶于水,與乙醇、乙mi、氯fang可混溶。
(一)提取原理
本實驗用水蒸氣蒸餾法提取丁香揮發(fā)油。利用*為苯丙素類衍生物,具有酚羥基,遇到氫氧化鈉水溶液即轉(zhuǎn)為鈉鹽而溶解,酸化時又可游離的性質(zhì)將*從揮發(fā)油中分離出來。并利用可與三氯化鐵試劑發(fā)生反應(yīng)的性質(zhì)進(jìn)行檢識,也可進(jìn)行薄層色譜檢識。
(二)實驗內(nèi)容
1.丁香油的提取 取丁香50g,搗碎,置于燒瓶中,加適量水浸泡濕潤,按一般水蒸氣蒸餾法進(jìn)行蒸餾提取。也可將搗碎的丁香置于揮發(fā)油測定器的燒瓶中,加蒸餾水300ml與數(shù)粒玻璃珠,連接揮發(fā)油測定器。自測定器上端加水使充滿刻度部分,并溢流入燒瓶時為止,加入1ml二甲苯,然后連接回流冷凝管。加熱蒸餾30分鐘后,停止加熱,放置15分鐘以上,讀取測定器中二甲苯油層容積,減去開始蒸餾前加入二甲苯的量,即為揮發(fā)油的量,再計算出丁香中揮發(fā)油的含量。
2.*的分離 將所得的丁香油置于分液漏斗中,加10%氫氧化鈉溶液80ml提取,并加150ml蒸餾水稀釋,分取下層水溶液,用10%鹽酸酸化使*呈油狀液體,分取油層,用*脫水干燥,得純品*。
3.檢識 取少許*置于試管中,加1ml乙醇溶解,加2~3滴三氯化鐵試劑,顯藍(lán)色。
4.薄層色譜檢識 將提取得到的丁香油用乙mi配制成每1ml含0.02ml丁香油的供試液。另取*對照品,加乙mo制成每1ml含20微升的對照品溶液,吸取上述兩種溶液各5微升,分別點于同一硅膠g薄層色譜板上,以石油醚(60~90℃)-醋酸乙酯(9∶1)為展開劑,展開,取出,晾干,噴灑5%*硫酸溶液,于105℃加熱烘干。在供試品色譜與對照品色譜相應(yīng)的位置上,顯相同顏色的斑點。
(三)實驗說明及注意事項
1.采用揮發(fā)油含量測定器提取揮發(fā)油,可以初步了解該藥材中揮發(fā)油的含量,但所用的藥材量應(yīng)使蒸出的揮發(fā)油量不少于0.5ml為宜。
2.揮發(fā)油含量測定裝置一般分為兩種,一種適用于相對密度小于1.0的揮發(fā)油測定。另一種適用于測定相對密度大于1.0的揮發(fā)油?!端幍洹芬?guī)定,測定相對密度大于1.0的揮發(fā)油,也在相對密度小于1.0的測定器中進(jìn)行,其作法是在加熱前,預(yù)先加入1ml二甲苯于測定器內(nèi),然后進(jìn)行水蒸氣蒸餾,使蒸出的相對密度大于1.0的揮發(fā)油溶于二甲苯中。由于二甲苯的相對密度為0.8969,一般能使揮發(fā)油與二甲苯的混合溶液浮于水面。由測定器刻度部分讀取油層的量時,扣除加入二甲苯的體積即為揮發(fā)油的量。
3.用揮發(fā)油測定器提取揮發(fā)油,以測定器刻度管中的油量不再增加作為判斷是否提取*的標(biāo)準(zhǔn)。