落射熒光干涉和吸收濾光片組合位于一個(gè)激發(fā)塊(或光學(xué)模塊)中,包括激發(fā)濾光片,雙色分束器(通常稱為反射鏡)和屏障(或激發(fā))濾光片,如圖1(a)所示。使用本指南選擇合適的濾光片組,以匹配在寬視野熒光顯微鏡研究中使用的生色團(tuán)的光譜激發(fā)和激發(fā)特性。典型的高性能帶通激發(fā)藍(lán)色激發(fā)濾光片組合的光譜圖作為示例在圖1(b)中給出。尼康熒光濾光片組合分別提供窄,中和寬通帶激發(fā)塊,并具有帶通或長(zhǎng)通頻譜特性的相應(yīng)激發(fā)濾波器。
圖1-熒光濾光片組合光譜圖
紫外線激發(fā) -尼康紫外線激發(fā)熒光濾光片產(chǎn)品組合中包含四種精心平衡的組合,這些組合包含帶通或長(zhǎng)通激發(fā)(屏障)濾光片,能夠選擇性地隔離可見(jiàn),深藍(lán)色,綠色和紅色的狹窄或?qū)掗焻^(qū)域的熒光波長(zhǎng)。這些濾光片組合覆蓋了330至380納米的激發(fā)波長(zhǎng)范圍,通帶寬度分布為10、40和50納米。三種組合使用相同的雙色鏡,而第四組具有較低波長(zhǎng)截止的鏡面,以與其更窄的激發(fā)帶一致。紫外線濾光片組包含長(zhǎng)通或單帶通濾光片。
紫羅蘭色激發(fā) -尼康紫羅蘭色激發(fā)熒光濾光片系列包括三種組合,分別包含帶通濾光片或長(zhǎng)通激發(fā)濾光片(屏障),這些濾光片能夠選擇性地隔離藍(lán),綠和紅色波長(zhǎng)的狹窄或較寬區(qū)域的熒光激發(fā)。這些組合覆蓋了379-420納米之間的激發(fā)波長(zhǎng)范圍,帶通寬度分布分別為10、22和40納米。兩種組合使用相同的雙色鏡,而第三組使用的截止波長(zhǎng)較低的鏡與其較短波長(zhǎng)的激發(fā)帶一致。
藍(lán)紫色激發(fā) -尼康藍(lán)紫色激發(fā)熒光濾光片產(chǎn)品組合中包含四種組合,包括帶通或長(zhǎng)通激發(fā)(阻擋)濾光片,能夠選擇性地隔離通過(guò)青色,綠色和綠色的狹窄或?qū)掗焻^(qū)域的熒光激發(fā)紅色波長(zhǎng)。這些互補(bǔ)濾光片組的激發(fā)波長(zhǎng)范圍在400-446納米之間,帶通寬度分布為10、20和40納米。三種組合使用相同的雙色鏡,而第四組具有更高的截止波長(zhǎng)(5納米)以與其其他組件一致的鏡。
藍(lán)色激發(fā) - 尼康藍(lán)光激發(fā)熒光濾光片補(bǔ)充劑由六個(gè)平衡組合組成,包含帶通或長(zhǎng)通激發(fā)(屏障)濾光片,能夠通過(guò)綠色,黃色,紅色和近紅外的窄帶或?qū)拵нx擇性地隔離熒光激發(fā)光譜區(qū)域。這些濾光片組的激發(fā)波長(zhǎng)范圍在420至495納米之間,帶通寬度分布為20、30、40和70納米。五個(gè)組合使用相同的雙色鏡,而第六個(gè)組合使用了較低波長(zhǎng)截止的鏡以增加獲取的信號(hào)。用于尼康藍(lán)色激發(fā)濾光片組合的帶通屏障濾光片的光譜寬度均為40納米。激發(fā)塊之一(b-3a)設(shè)計(jì)用于鹵素鎢燈照明。
綠色激發(fā) - 尼康綠色激發(fā)熒光濾光片組合系列包括六個(gè)模塊,這些濾光片結(jié)合了單帶通或長(zhǎng)通激發(fā)(阻擋)濾光片,能夠選擇性地隔離黃色,橙色,紅色和近紅外光譜區(qū)域的窄帶或?qū)掝l帶內(nèi)的熒光。這些濾光片組合的激發(fā)波長(zhǎng)范圍在510到560納米之間,通帶寬度分布為10、25、30和50納米(包括窄,中和寬激發(fā)帶)。三種組合使用相同的雙色鏡(565納米),而其他三種具有更高的波長(zhǎng)截止值(570或575納米)的鏡。六個(gè)尼康綠色激發(fā)濾光片組中的兩個(gè)包含帶寬為60和75納米的帶通勢(shì)壘濾光片。
黃色激發(fā) - 尼康公司的黃色激發(fā)熒光濾光片組合包括兩個(gè)平衡組,這些濾光片結(jié)合了單個(gè)帶通(屏障)濾光片,能夠選擇性地隔離橙色到紅色光譜區(qū)域內(nèi)的熒光激發(fā)。這些互補(bǔ)濾光片組合的激發(fā)波長(zhǎng)范圍為532至587納米,通帶寬度為40和55納米。兩種組合都使用相同的長(zhǎng)通二色鏡(切入595納米)。兩個(gè)尼康黃色激發(fā)濾光片組包含帶寬為60和75納米的帶通勢(shì)壘濾光片。
紅色激發(fā) - 尼康紅色激發(fā)熒光濾光片組合類別包括一個(gè)單獨(dú)的模塊,該模塊結(jié)合了一個(gè)帶通激發(fā)(屏障)濾光片,能夠選擇性地隔離在深紅色至近紅外光譜區(qū)域中發(fā)生的熒光激發(fā)。屏障濾波器的通帶以700納米為中心,帶寬為75納米(663至738納米)。涵蓋橙色和紅色波長(zhǎng)的寬60納米激發(fā)帶覆蓋590至650納米的光譜范圍。所述的cy5 hyq組合采用具有長(zhǎng)通二色鏡的切口上的660個(gè)納米,這比帶通激發(fā)截止更高10個(gè)納米的波長(zhǎng)。
黃色熒光蛋白(yfp)激發(fā) - 尼康黃色熒光蛋白熒光濾光片類別包含一個(gè)高性能的平衡組合,可有效地將三個(gè)綠色熒光蛋白(gfp)濾光片組提供的熒光蛋白檢測(cè)功能擴(kuò)展到更長(zhǎng)的增強(qiáng)波長(zhǎng)gfp的黃色變體(yfp和eyfp)。該yfp hyq濾光片組合采用相對(duì)較窄的通帶激發(fā)和激發(fā)(屏障)濾光片,其設(shè)計(jì)與增強(qiáng)型黃色熒光蛋白的特定光譜特征相對(duì)應(yīng),并使yfp衍生物的熒光激發(fā)能夠與其他熒光蛋白分開(kāi)進(jìn)行評(píng)估。
雙通激發(fā) - 尼康雙通熒光濾光片產(chǎn)品組合包括三個(gè)精心平衡的組合,其中包含雙通通激發(fā)和激發(fā)(阻擋)濾光片,這些濾光片被合并到一個(gè)元件中,該元件能夠同時(shí)從兩個(gè)熒光團(tuán)中選擇性地分離出熒光激發(fā)。每個(gè)濾光片組都針對(duì)特定的熒光染料對(duì)而設(shè)計(jì),以實(shí)現(xiàn)良好性能,盡管它們對(duì)具有相似吸收和激發(fā)光譜曲線的熒光探針對(duì)也同樣有效。利用精確的波段選擇,在反射和透射區(qū)域之間進(jìn)行陡峭的帶通過(guò)渡,可以以小的交叉干擾將多個(gè)激發(fā)和激發(fā)信號(hào)分開(kāi)。
三通激發(fā) - 尼康提供的三通激發(fā)帶熒光濾光片包括兩個(gè)平衡塊,其中包含三通帶通激發(fā)和激發(fā)(阻擋)濾光片,能夠同時(shí)從三個(gè)熒光團(tuán)中選擇性分離出熒光。每個(gè)濾波器組都針對(duì)特定的三熒光染料套件而設(shè)計(jì),以實(shí)現(xiàn)良好性能,盡管它們對(duì)于具有相似吸收和激發(fā)光譜曲線的備用探頭組合也同樣有效。利用精確的波段選擇,在反射和透射區(qū)域之間進(jìn)行陡峭的帶通過(guò)渡,將多個(gè)激發(fā)和激發(fā)信號(hào)分離開(kāi)來(lái),從而將干擾降到低。
hyq激發(fā) -尼康hyq熒光濾光片組合組包含四個(gè)精心平衡的高性能套件,所有這些套件均集成了帶通激發(fā)(屏障)濾光片,用于選擇性隔離有限波長(zhǎng)范圍內(nèi)的熒光。每個(gè)hyq濾鏡組的名稱都反映了其主要設(shè)計(jì)的熒光染料的名稱,但是在其各自的激發(fā)范圍內(nèi),每種組合都可以應(yīng)用于各種合適的熒光染料。
尼康熒光濾光片組合列表尼康采用的濾鏡命名法可追溯到1990年代初。當(dāng)時(shí),所有尼康互補(bǔ)濾鏡組合都是使用硬涂層濺射技術(shù)生產(chǎn)的,但是許多當(dāng)前可用的濾鏡都利用了較新的較軟的鍍膜方法。盡管軟涂層較易受濕氣和熱降解的影響,并且比硬涂層濾光片必須更小心地處理,但它們顯示出更高的阻隔值光學(xué)密度,并且更易于微調(diào)特定的波長(zhǎng)帶。了解尼康濾鏡組合代碼的命名法提供了一種機(jī)制,可以快速確定特定的組對(duì)于特定的熒光團(tuán)是否可以充分發(fā)揮作用。
尼康專有的字母數(shù)字濾波器名稱代碼中的個(gè)字母表示波長(zhǎng)激發(fā)光譜區(qū)域(例如uv,v,b和g,分別是紫外線,紫羅蘭,藍(lán)色和綠色的簡(jiǎn)單縮寫(xiě))。激發(fā)代碼后的數(shù)字與激發(fā)濾波器的通帶寬度有關(guān):1表示窄帶激發(fā),2表示中頻帶和寬帶激發(fā),3表示非常寬帶的激發(fā)。后,激發(fā)帶通大小數(shù)字后面的一個(gè)或多個(gè)字母標(biāo)識(shí)了屏障濾波器的特性。代號(hào)字母a表示截止波長(zhǎng)的標(biāo)準(zhǔn)長(zhǎng)通屏障濾光片,而b表示長(zhǎng)通激發(fā)濾光片的截止波長(zhǎng)值較高。帶通激發(fā)濾波器用字母e標(biāo)識(shí)(指術(shù)語(yǔ)“增強(qiáng)型”),以表示它們?cè)谙徊娣矫娴膬?yōu)越性能。在e/c激發(fā)塊是設(shè)計(jì)為與特定的探針,如dapi,fitc,tritc,和德克薩斯紅良好性能軟涂層干擾的組合。
紫外線激發(fā)uv-2e/c - uv-2e/c濾光片組合設(shè)計(jì)為用于紫外線熒光的尖銳截止濾光片。濾波器是軟涂層類型的,旨在產(chǎn)生高信噪比。此組合中使用的窄帶通屏障濾光片旨在顯著減少或*消除綠色和紅色可見(jiàn)波長(zhǎng)。
uv-1a - uv-1a組合設(shè)計(jì)為用于紫外線熒光的濾光片,具有窄的激發(fā)帶通(僅使用汞光譜的i線)和窄的二色鏡通帶,可大程度地減少自發(fā)熒光和光漂白。
uv-2a - uv-2a濾光片組合被設(shè)計(jì)為用于紫外線熒光的標(biāo)準(zhǔn)濾光片,并且是尼康調(diào)色板中設(shè)置的亮的紫外線濾光片。
uv-2b - uv-2b組合被設(shè)計(jì)為用于紫外線熒光的通用濾光片,與uv-2a濾光片組合相比,它提供了更暗的背景和更好的對(duì)比度。
紫羅蘭色激發(fā)v-1a - v-1a濾光片組合設(shè)計(jì)為帶窄帶通區(qū)域的紫光熒光激發(fā)濾光片,可大程度地減少自發(fā)熒光。長(zhǎng)通激發(fā)濾光片允許檢測(cè)各種熒光染料波長(zhǎng)。
v-2a - v-2a組合設(shè)計(jì)為多功能性標(biāo)準(zhǔn)紫色熒光濾光片。使用中等激發(fā)帶通和長(zhǎng)通激發(fā)濾光片,所產(chǎn)生的圖像是尼康紫色濾光片組中亮的。
bfp(藍(lán)色熒光蛋白) - bfp濾波器塊結(jié)合了窄的激發(fā)帶用帶通的激發(fā)濾光片,以限制自體熒光以及來(lái)自紅色和綠色的熒光團(tuán)排除激發(fā)的檢測(cè)。這種濾光片組合非常適合對(duì)藍(lán)色熒光蛋白衍生物成像。
藍(lán)紫色激發(fā)bv-1a -bv-1a濾光片組合設(shè)計(jì)為用于藍(lán)紫色熒光激發(fā)的濾光片,其帶寬非常窄,可大程度地減少樣品的自發(fā)熒光。長(zhǎng)通激發(fā)濾光片允許檢測(cè)各種熒光染料波長(zhǎng)。
bv-2a - bv-2a組合設(shè)計(jì)為標(biāo)準(zhǔn)的藍(lán)紫色熒光濾光片。使用中等激發(fā)濾光片帶通和長(zhǎng)通激發(fā)濾光片,這種組合所產(chǎn)生的圖像是尼康藍(lán)紫色濾光片組中亮的。
bv-2b - bv-2b組合設(shè)計(jì)為藍(lán)紫色熒光的濾光片,與標(biāo)準(zhǔn)bv-2a濾光片組合相比,可提供更暗的背景和更高的對(duì)比度。
cfp(青色熒光蛋白) - cfp濾波器塊結(jié)合了一個(gè)帶通的激發(fā)濾光片,以限制自體熒光,以及排除的紅色,黃色和綠色的許多發(fā)光的熒光染料檢測(cè)窄激發(fā)帶寬。
藍(lán)色激發(fā)b-1a - b-1a濾光片組合設(shè)計(jì)有較窄的激發(fā)通帶,以減少自發(fā)熒光和光致漂白。長(zhǎng)通屏障(激發(fā))濾光片能夠傳輸來(lái)自綠色,黃色,橙色和紅色熒光團(tuán)的信號(hào),這些信號(hào)在對(duì)應(yīng)于激發(fā)帶通窗口的上部藍(lán)色波長(zhǎng)區(qū)域中具有明顯的吸收。
b-2a - b-2a濾鏡組合是尼康藍(lán)光激發(fā)組中設(shè)置的標(biāo)準(zhǔn)濾鏡。與b-1a組合相比,其設(shè)計(jì)結(jié)合了寬的激發(fā)帶通,從而為熒光團(tuán)提供了更大的吸收窗口,并且該裝置還具有較低的雙色鏡和阻隔濾光片截止波長(zhǎng),與b相比,產(chǎn)生了增強(qiáng)的圖像亮度-1a濾波器組。
b-3a - b-3a濾光片組合使用了與b-1a套裝相同的雙色鏡和長(zhǎng)通激發(fā)濾光片,但采用了非常寬的激發(fā)帶,使其適用于鹵鎢燈。這種結(jié)合使得能夠傳輸來(lái)自綠色,黃色,橙色和紅色熒光團(tuán)的大量信號(hào),這些熒光團(tuán)在藍(lán)色波長(zhǎng)區(qū)域具有吸收帶。
b-1e - b-1e濾光片組合是藍(lán)色熒光激發(fā)系列中三組之一,該濾光片與帶通濾光片相反,是利用帶通的,主要區(qū)別在于激發(fā)帶的寬度。每個(gè)帶通屏障濾波器組提供的性能均適用于對(duì)標(biāo)有異硫氰酸熒光素(fitc)的標(biāo)本進(jìn)行成像(綠色激發(fā)),同時(shí)阻止黃色,橙色和紅色激發(fā)。的b-1e組合與所述帶通激發(fā)(阻擋)濾波器結(jié)合使用窄帶通激發(fā)濾光片。
b-2e - b-2e濾光片組合采用寬激發(fā)帶通,其波長(zhǎng)比b-1e組的激發(fā)帶低20納米。b-1e和b-2e濾鏡組合中的雙色鏡和帶通屏障濾鏡規(guī)格相同。
b-2e/c - b-2e/c激發(fā)塊組合使用的介質(zhì)寬度的激發(fā)帶結(jié)合相比略微降低激發(fā)帶通波長(zhǎng)區(qū)域b-1e和b-2e集。該性能經(jīng)過(guò)優(yōu)化,可檢測(cè)多種標(biāo)記實(shí)驗(yàn)中使用的多種流行的熒光團(tuán),同時(shí)提供了更好的黃色到紅色波長(zhǎng)的排除。
綠色激發(fā)g-1a-用于綠色波長(zhǎng)激發(fā)的g-1a濾光片組合設(shè)計(jì)有狹窄的激發(fā)帶通,以減少自發(fā)熒光并大程度地減少樣品輻射的暴露。長(zhǎng)通屏障(激發(fā))濾光片能夠傳輸黃色,橙色和紅色熒光團(tuán)的信號(hào),這些熒光團(tuán)在中心綠色波長(zhǎng)區(qū)域具有明顯的吸收率。
g-1b - g-1b濾波器組合具有相似部件簡(jiǎn)檔的g-1a組,納入窄激發(fā)帶通,以減少自體熒光和試件破壞,但具有不同的二色鏡和激發(fā)濾光器切口上的波長(zhǎng)。激發(fā)濾光片截止到較長(zhǎng)波長(zhǎng)的偏移會(huì)產(chǎn)生圖像,由于增加了對(duì)黃色激發(fā)的阻擋,因此圖像顯得較紅。
g-2a - g-2a濾光片組合配置為標(biāo)準(zhǔn)的綠色濾光片模塊,具有寬的激發(fā)通帶,適用于由綠色波長(zhǎng)激活的大量熒光團(tuán)。長(zhǎng)通激發(fā)濾光片允許檢測(cè)比黃色光譜區(qū)域更長(zhǎng)的所有熒光波長(zhǎng)。
g-2b - g-2b濾波器組合的設(shè)計(jì)具有與g-2a濾波器模塊相同的激發(fā)特性。但是,在使用更高的雙色鏡和激發(fā)濾光片截止波長(zhǎng)的情況下,g-2b套裝可產(chǎn)生背景更暗,顏色向紅色偏移的圖像。
g-2e/c - g-2e/c濾光片組合設(shè)計(jì)用于良好性能,可與多種用于多種標(biāo)記實(shí)驗(yàn)的流行熒光探針配合使用。窄激發(fā)帶通提供選擇性激發(fā),而帶通激發(fā)濾光片則減少了以紅色和近紅外激發(fā)的熒光團(tuán)的干擾。
cy3 hyq - cy3綠色激發(fā)濾光片組合的配置與g-2e/c裝置相似。但是,隨著激發(fā)通帶的擴(kuò)大和激發(fā)帶通的擴(kuò)大以涵蓋更低的波長(zhǎng),cy3濾光片塊產(chǎn)生的圖像會(huì)更亮一些,并反映出更多黃色光譜區(qū)域激發(fā)的檢測(cè)。
黃色激發(fā)y-2 /c - 用于黃色波長(zhǎng)激發(fā)的y-2e/c濾光片組合被設(shè)計(jì)為與德州紅和cy3.5一起使用的濾光片套件,盡管其激發(fā)帶寬跨越了大多數(shù)黃色波長(zhǎng)(重疊一部分) (綠色區(qū)域),則該套色可以與一系列其他熒光染料一起使用。帶通屏障濾光片可傳輸來(lái)自激發(fā)橙色和橙色紅色熒光的信號(hào),同時(shí)消除大多數(shù)紅色和近紅外激發(fā)。
texas red hyq - texas red hyq濾鏡組合具有與y-2e/c裝置相似的組件配置,但具有更寬的激發(fā)和激發(fā)帶通窗,這使它可以傳輸更多的能量并產(chǎn)生相對(duì)明亮的圖像。由于激發(fā)濾光器通帶擴(kuò)展到紅色光譜區(qū)域中的較長(zhǎng)波長(zhǎng),因此所得圖像還反射了其他紅色熒光信號(hào)。
紅色激發(fā)cy5 hyq - 用于紅色波長(zhǎng)激發(fā)的cy5 hyq濾光片組合旨在提供熒光團(tuán)cy5的高能量激發(fā),盡管寬激發(fā)范圍(黃橙色至紅色)允許該裝置與各種熒光染料一起使用。反射區(qū)和透射區(qū)之間的陡峭濾波器過(guò)渡可與寬帶寬使用帶來(lái)的高亮度水平相結(jié)合,從而保持信號(hào)分離。帶通屏障濾波器將信號(hào)從遠(yuǎn)紅外傳輸?shù)浇t外,該波長(zhǎng)范圍是使用電子檢測(cè)器(例如不帶紅外濾光片的光電倍增管和ccd攝像機(jī))有效地檢測(cè)到的。
雙通激發(fā)dapi-fitc - dapi-fitc濾光片組合設(shè)計(jì)用于同時(shí)檢測(cè)熒光染料dapi和fitc或具有類似光譜特性的其他配對(duì)熒光探針的激發(fā)。雙重窄的激發(fā)帶和激發(fā)帶對(duì)應(yīng)于紫色激發(fā)的特定區(qū)域以及相應(yīng)的藍(lán)色激發(fā),并且藍(lán)色激發(fā)耦合到綠色激發(fā)。
fitc-tritc - fitc-tritc濾光片組合設(shè)計(jì)用于同時(shí)檢測(cè)熒光染料fitc和tritc或光譜相似的探針對(duì)的激發(fā)。帶通激發(fā)和激發(fā)濾波器允許兩個(gè)信號(hào)通道,一個(gè)對(duì)應(yīng)于藍(lán)色激發(fā)和綠色激發(fā)的特定狹窄區(qū)域,另一個(gè)對(duì)應(yīng)于綠色激發(fā)和橙紅色激發(fā)。
fitc-texas red - fitc-德克薩斯紅濾波器組合被設(shè)計(jì)有用于藍(lán)色激發(fā)和綠色激發(fā)稍微不同的帶通區(qū)相比,當(dāng)fitc-tritc集,允許fitc的更有效的激發(fā)。這些偏移符合德克薩斯紅(綠色激發(fā);紅色激發(fā))波段的波長(zhǎng)范圍稍高的情況。多個(gè)帶通區(qū)域以小的串?dāng)_提供了良好檢測(cè),可同時(shí)顯示fitc和texas red或光譜相似的熒光團(tuán)對(duì)。
三通激發(fā)dapi-fitc-tritc - dapi-fitc-tritc濾光片組合旨在用于同時(shí)檢測(cè)熒光染料dapi,fitc和tritc或具有相似光譜特性的其他探針組合的激發(fā)。三個(gè)窄的激發(fā)帶和激發(fā)帶分別對(duì)應(yīng)于具有相應(yīng)的藍(lán)色激發(fā),耦合到綠色激發(fā)的藍(lán)色激發(fā)以及具有橙紅色激發(fā)的綠色激發(fā)的紫色激發(fā)的特定區(qū)域。
dapi-fitc-texas red - 與標(biāo)準(zhǔn)dapi-fitc-tritc相比,dapi-fitc-德克薩斯紅濾光片組合設(shè)計(jì)的通帶區(qū)域略有不同,紫色激發(fā)-藍(lán)色激發(fā),藍(lán)色激發(fā)-綠色激發(fā)。相對(duì)于tritc的值,此設(shè)計(jì)旨在更好地符合texas red所需的更高激發(fā)和激發(fā)波長(zhǎng)。多個(gè)帶通區(qū)域可提供良好的檢測(cè),同時(shí)具有小的交叉和噪聲,可同時(shí)顯示dapi,fitc和texas red或光譜相似的熒光團(tuán)組合。
hyq激發(fā)塊組合tritc hyq - 用于綠色波長(zhǎng)激發(fā)的tritc hyq濾光片組合旨在提高tritc和dii等熒光染料的性能。與本應(yīng)用中通常使用的一些綠色激發(fā)光相比,更寬的激發(fā)通帶和紅移雙色鏡截止信號(hào)為這些熒光團(tuán)提供了更高的信號(hào)水平,并允許更好地檢測(cè)dsred熒光蛋白變體和遠(yuǎn)紅色熒光hcred蛋白。
cy3 hyq - cy3 hyq綠色激發(fā)濾光片組合具有與g-2e/c裝置相似的組件特性,盡管它通過(guò)擴(kuò)展的通帶窗產(chǎn)生增加的激發(fā)和激發(fā)能量。此外,激發(fā)通帶延伸到較低的波長(zhǎng)(進(jìn)入黃色),從而導(dǎo)致圖像既明亮,又偏黃橙色。這是用于檢測(cè)花青熒光探針cy3的推薦濾光片組合,尤其是在多標(biāo)記技術(shù)中,它可以減少來(lái)自遠(yuǎn)紅光和近紅外光的熒光團(tuán)的干擾。
texas red hyq - texas red hyq濾光片組合經(jīng)過(guò)優(yōu)化,可與熒光探針texas red和cy3.5配合使用,其激發(fā)和激發(fā)通帶比類似的y-2e/c集寬。與y-2e/c裝置相比,由于得到的信號(hào)電平更高,并且激發(fā)通帶擴(kuò)展到了更長(zhǎng)的波長(zhǎng),因此這種組合產(chǎn)生的圖像在色調(diào)上更明亮,更紅。在德克薩斯紅hyq組合提供了一種用于發(fā)光探針在超過(guò)的上限波長(zhǎng)改進(jìn)的性能的y 2e / c的激發(fā)帶,同時(shí)限制從熒光團(tuán)激發(fā)的深紅色和近紅外的干擾。
cy5 hyq - cy5 hyq濾光片組合是為高能紅色波長(zhǎng)激發(fā)而設(shè)計(jì)的尼康套裝,盡管針對(duì)熒光團(tuán)cy5進(jìn)行了優(yōu)化,但寬泛的黃橙色至紅色激發(fā)范圍適用于使用各種熒光染料。與激發(fā)濾光片通帶相對(duì)應(yīng)的在從近紅外到近紅外波長(zhǎng)產(chǎn)生的熒光在很大程度上是人眼看不見(jiàn)的,而有效的檢測(cè)則需要使用光電倍增管或ccd攝像機(jī)。寬的濾波器帶通區(qū)域,加上陡峭的導(dǎo)通和截止過(guò)渡,可保持hyq濾波器系列的大信號(hào)分離度和信噪比。
熒光蛋白激發(fā)塊組合endow gfp長(zhǎng)通激發(fā)(fgp(r)-lp) - endow gfp長(zhǎng)通激發(fā)濾波器的組合是endowgfp帶通濾波器組的長(zhǎng)通版本和由杜克大學(xué)的sharyn endow博士設(shè)計(jì)。該濾光片組可用于利用wtgfp和egfp進(jìn)行熒光研究。與該系列中的其他濾光片一起,設(shè)計(jì)該套件的目的是增加次級(jí)熒光強(qiáng)度(亮度),而不會(huì)相應(yīng)地增加噪聲水平。通過(guò)增加激發(fā)和激發(fā)濾波器中的干涉腔的數(shù)量來(lái)創(chuàng)建更陡峭的通帶,從而使濾波器頻譜之間更加接近。由此產(chǎn)生的更寬和更陡峭的濾光片光譜使該裝置可以提供更多的激發(fā)并捕獲更多的熒光強(qiáng)度。
endow gfp帶通激發(fā)(fgp(r)-bp) - endow gfp帶通激發(fā)(fgp(r)-bp)濾波器的組合是endowgfp長(zhǎng)通濾波器組的帶通版本和由杜克大學(xué)的sharyn endow博士設(shè)計(jì)。該濾光片組可用于利用wtgfp和egfp進(jìn)行熒光研究,并且是分布廣的gfp濾光片組之一。
piston gfp帶通激發(fā) - piston gfp帶通激發(fā)濾波器組合是范德比爾特大學(xué)的david piston博士設(shè)計(jì)的帶通濾波器組。激發(fā)濾光片具有窄帶通,可用于定量egfp(綠色熒光蛋白)熒光,同時(shí)避免波長(zhǎng)超過(guò)540納米的自發(fā)熒光。
黃色熒光蛋白帶通激發(fā)(yfp hyq) - 尼康黃色熒光蛋白yfp hyq濾光片套件設(shè)計(jì)用于在藍(lán)綠色光譜區(qū)域中的窄(20納米)波長(zhǎng)帶上透射激發(fā)光,并激發(fā)綠色到黃色在30納米帶通區(qū)域內(nèi)進(jìn)行檢測(cè)。該模塊經(jīng)過(guò)優(yōu)化,可用于yfp成像,同時(shí)在雙重染色技術(shù)中仍可區(qū)分青色熒光蛋白。