丙酮酸激酶(pk)測試盒的組成
(測血清、血漿、組織)
一、測定原理:
丙酮酸激酶(pyruvate kinase. pk)在 adp 存在下可
催化 pep 產(chǎn)生丙酮酸,丙酮酸再由 ldh 將其轉(zhuǎn)變?yōu)槿?br>酸,同時將 nadh 變?yōu)?nad。
二、試劑組成與配制:(50 管/48 樣)
試劑一:液體 60ml×1 瓶,4℃保存。
試劑二:粉劑×2 支,-20℃保存,每支用時加雙蒸水
1.4ml,用不完放-20℃以下保存 3~7 天。(如
果你的樣本量少,可以將配好的 1.4ml 再分
成 2~3 管放-20℃以下保存,每次取一管用,
以免反復(fù)凍融)
試劑三:液體×4 支,4℃保存,不可冷凍,用不完的仍
放 4~8℃保存。
試劑四:粉劑×4 支,-20℃保存,用時每支加雙蒸水
320µl,用不完放-20℃以下保存。
試劑五:粉劑×4 支,-20℃保存,用時每支加雙蒸水
650µl,用不完放-20℃以下保存。
三、操作過程:
1、樣本前處理:
①、血清(漿)樣本:直接檢測。
②、組織樣本:準(zhǔn)確稱取組織重量按重量(g)
:體積(ml)
=1:9 的比例,加入 9 倍體積的生理鹽水,冰
水浴條件下機械勻漿,制成 10%勻漿,2500
轉(zhuǎn)/分,離心 10 分鐘,取上清再用生理鹽水
稀釋成適當(dāng)濃度勻漿上清待測(請做 1~2
個濃度的預(yù)試驗)。(取得的上清液需測蛋白
濃度,蛋白定量試劑盒本所有售)
2、操作表:
丙酮酸激酶(pk)測試盒的組成