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      四角瑞氏絳蟲探針法熒光定量PCR檢測試劑盒檢測方法

      發(fā)布時間:2024-10-08
      四角瑞氏絳蟲探針法熒光定量pcr檢測試劑盒檢測方法:
      1.ⅰ法:
      在pcr反應體系中,加入過量sybr熒光染料,sybr熒光染料特異性地摻入dna雙鏈后,發(fā)射熒光信號,而不摻入鏈中的sybr染料分子不會發(fā)射任何熒光信號,從而保證熒光信號的增加與pcr產物的增加*同步。
      定量pcr擴增熒光曲線圖
      pcr產物熔解曲線圖
      2.taqman探針法:
      探針完整時,報告基團發(fā)射的熒光信號被淬滅基團吸收;pcr擴增時,taq酶的5’-3’外切酶活性將探針酶切降解,產品僅用于科研使報告熒光基團和淬滅熒光基團分離,從而熒光監(jiān)測系統(tǒng)可接收到熒光信號,即每擴增一條dna鏈,就有一個熒光分子形成,實現了熒光信號的累積與pcr產物的形成*同步。
      所謂實時熒光定量pcr技術,是指在pcr反應體系中加入熒光基團,利用熒光信號積累實時監(jiān)測整個pcr進程,后通過標準曲線對未知模板進行定量分析的方法。
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