當(dāng)前位置:首頁>生理生化試劑盒>微量酶標(biāo)儀法>氮代謝系列>*脫氫酶（glutamate dehydrogenase，gdh）活性檢測試劑盒
*脫氫酶（glutamate dehydrogenase，gdh）活性檢測試劑盒商品貨號：ms1803
英文名稱：micro glutamic acid dehydrogenase（gdh）assay kit
別名：*脫氫酶試劑盒 gdh kit *脫氫酶（gdh）試劑盒 *脫氫酶（gdh）測試盒
檢測方法：微量法
商品貨號：商品品牌：規(guī)格基本售價選擇規(guī)格
ms1803 -100管/96樣 索橋生物 100管/96樣 ￥1100.00元
產(chǎn)品詳細(xì)介紹
測定意義：
gdh（ec 1.4.1.2）廣泛分布于植物中，和*合成酶（gogat）共同參與*的合成，在氨同化和轉(zhuǎn)化成有機(jī)氮化合物的代謝中起重要作用。
測定原理：
gdh催化nh4+、α-酮戊二酸和nadh，生成*和nad+，引起340nm吸光度下降。通過測定340nm吸光度的下降速率，計算gdh活性。
產(chǎn)品說明書
貨號：qs1803 規(guī)格：50 管/48 樣
*脫氫酶（glutamate dehydrogenase，gdh）試劑盒說明書 紫外分光光度法
正式測定前務(wù)必取 2-3 個預(yù)期差異較大的樣本做預(yù)測定
測定意義：
gdh（ec 1.4.1.2）廣泛分布于植物中，和*合成酶（gogat）共同參與*的合成， 在氨同化和轉(zhuǎn)化成有機(jī)氮化合物的代謝中起重要作用。
測定原理：
gdh 催化 nh4 +、α -酮戊二酸和 nadh，生成*和 nad+，引起 340nm 吸光度下降。通過 測定 340nm 吸光度的下降速率，計算 gdh 活性。
自備實驗用品及儀器：
紫外分光光度計、臺式離心機(jī)、水浴鍋、移液器、1ml 石英比色皿、研缽、冰和蒸餾水。
試劑組成和配制：
提取液：液體 60ml×1 瓶，4℃保存；
試劑一：液體 60ml×1 瓶，4℃保存；
試劑二：粉劑×1 支，4℃保存；
試劑三：粉劑×1 支，4℃保存；
試劑四：粉劑×1 支，-20℃保存。
粗酶液提取：
細(xì)菌或培養(yǎng)細(xì)胞：先收集細(xì)菌或細(xì)胞到離心管內(nèi)，離心后棄上清；按照細(xì)菌或細(xì)胞數(shù)量（10^4 個）：提取液體積（ml）為 500~1000：1 的比例（建議 500 萬細(xì)菌或細(xì)胞加入 1ml 提取液），超 聲波破碎細(xì)菌或細(xì)胞（冰浴，功率 20％或 200w，超聲 3s，間隔 10s，重復(fù) 30 次）；8000g 4℃ 離心 10min，取上清，置冰上待測。
組織：按照組織質(zhì)量（g）：提取液體積(ml)為 1：5~10 的比例（建議稱取約 0.1g 組織， 加入 1ml 提取液），進(jìn)行冰浴勻漿。8000g 4℃離心 10min，取上清，置冰上待測。
血清（漿）樣品：直接檢測。
測定步驟：
1、分光光度計預(yù)熱 30min 以上，調(diào)節(jié)波長至 340nm，蒸餾水調(diào)零。
2、樣本測定
（1）工作液的配制：臨用前將試劑二、三、四轉(zhuǎn)移到試劑一中混合溶解，置于 37℃（哺乳動 物）或 25℃（其它物種）水浴 5min；現(xiàn)配現(xiàn)用；
（2）取 0.05ml 樣本和 1ml 工作液于 1ml 比色皿中，混勻，加工作液的同時開始計時，在 340 nm 波長下記錄 20 秒時的初始吸光度 a1 和 5 分 20 秒時的吸光度 a2，計算 δ a=a1-a2。
gdh 活性計算：
1、血清（漿）中 gdh 活力的計算:
單位的定義：每毫升血清（漿）每分鐘消耗 1 nmol nadh 定義為一個酶活力單位。 gdh（nmol/min/ml）＝[δ a×v 反總÷（ε ×d）×10^9 ]÷v 樣÷t=675×δ a
2、組織、細(xì)菌或細(xì)胞中 gdh 活力的計算:
（1）按樣本蛋白濃度計算：
單位的定義：每 mg 組織蛋白每分鐘消耗 1 nmol nadh 定義為一個酶活力單位。
gdh（nmol/min /mg prot）＝[δ a×v 反總÷（ε ×d）×10^9 ]÷(v 樣×cpr) ÷t=675×δ a÷cpr
（2）按樣本鮮重計算：
單位的定義：每 g 組織每分鐘消耗 1 nmol nadh 定義為一個酶活力單位。
gdh （ nmol/min /g 鮮 重 ） ＝ [δ a×v 反 總 ÷ （ ε ×d ） ×10^9 ]÷(w× v 樣 ÷v 樣 總 ) ÷t=675×δ a÷w
（3）按細(xì)菌或細(xì)胞密度計算：
單位的定義：每 1 萬個細(xì)菌或細(xì)胞每分鐘消耗 1 nmol nadh 定義為一個酶活力單位。 gdh（nmol/min /10^4 cell）＝[δ a×v 反總÷（ε ×d）×10^9 ]÷(v 樣÷v 樣總×500) ÷t=1.35×δ a
v 反總：反應(yīng)體系總體積，1.05×10^-3 l；ε ：nadh 摩爾消光系數(shù)，6.22×10^3 l / mol /cm； d：比色皿光徑，1cm；v 樣：加入樣本體積，0.05 ml；v 樣總：加入提取液體積，1 ml；t： 反應(yīng)時間，5 min；cpr：樣本蛋白質(zhì)濃度，mg/ml；w：樣本質(zhì)量，g；500：細(xì)菌或細(xì)胞總數(shù)， 500 萬。
系列產(chǎn)品及價格
氮代謝系列
qs1800 硝酸還原酶(nr)測試盒 可見分光光度法 50管/24樣 240
ms1800 硝酸還原酶(nr)測試盒 微量法 100管/48樣 450
qs1801 *合成酶（gogat）測試盒 紫外分光光度法 50管/48樣 500
ms1801 *合成酶（gogat）測試盒 微量法 100管/96樣 950
qs1802 *酶（gls)測試盒 可見分光光度法 50管/48樣 580
ms1802 *酶（gls)測試盒 微量法 100管/96樣 1100
qs1803 *脫氫酶（gdh）測試盒 紫外分光光度法 50管/48樣 580
ms1803 *脫氫酶（gdh）測試盒 微量法 100管/96樣 1100
qs1805 水土中亞硝酸鹽含量測試盒 可見分光光度法 50管/48樣 140
ms1805 水土中亞硝酸鹽含量測試盒 微量法 100管/48樣 270
qs1806 食品中亞硝酸鹽含量測試盒 可見分光光度法 50管/48樣 200
ms1806 食品中亞硝酸鹽含量測試盒 微量法 100管/96樣 380
qs1807 *合成酶（gs)測試盒 可見分光光度法 50管/24樣 280
ms1807 *合成酶（gs)測試盒 微量法 100管/48樣 550
qs1808 植物硝態(tài)氮測試盒 可見分光光度法 50管/48樣 360
ms1808 植物硝態(tài)氮測試盒 微量法 100管/96樣 700
qs1811 植物氨態(tài)氮測試盒 可見分光光度法 50管/48樣 500
ms1811 植物氨態(tài)氮測試盒 微量法 100管/96樣 960
qs1812 尿素氮測試盒 可見分光光度法 50管/48樣 70
ms1812 尿素氮測試盒 微量法 100管/96樣 100
qs1813 亞硝酸還原酶(nir)測試盒 可見分光光度法 50管/24樣 650
ms1813 亞硝酸還原酶(nir)測試盒 微量法 100管/48樣 1250
qs1814 脲酶（ue）測試盒 可見分光光度法 50管/24樣 380
ms1814 脲酶（ue）測試盒 微量法 100管/48樣 750