細(xì)胞因子是一類具有蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)的分子,可在細(xì)胞之間傳遞信號(hào),調(diào)節(jié)免疫應(yīng)答和炎癥反應(yīng)等生物學(xué)過(guò)程。細(xì)胞因子的異常表達(dá)與多種疾病的發(fā)生和發(fā)展密切相關(guān)。因此,對(duì)細(xì)胞因子的檢測(cè)具有重要的臨床意義。細(xì)胞因子檢測(cè)的方法主要包括免疫學(xué)方法和分子生物學(xué)方法兩大類。其中,免疫學(xué)方法是常用和常規(guī)的方法。其原理主要基于抗原與抗體之間的特異性識(shí)別和結(jié)合。
在免疫學(xué)方法中,常用的技術(shù)包括酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(elisa)、流式細(xì)胞術(shù)、免疫組化等。其中,elisa是常見(jiàn)和通用的方法之一。其基本原理是利用特異性的抗體與待測(cè)細(xì)胞因子結(jié)合,然后通過(guò)酶標(biāo)記的二抗對(duì)抗體進(jìn)行檢測(cè)。elisa方法具有靈敏度高、特異性好、操作簡(jiǎn)便等優(yōu)點(diǎn),廣泛應(yīng)用于細(xì)胞因子的定量檢測(cè)。
流式細(xì)胞術(shù)是一種可多參數(shù)、快速、高通量的細(xì)胞因子檢測(cè)方法。其原理是將細(xì)胞因子標(biāo)記上熒光染料,使用流式細(xì)胞術(shù)儀器對(duì)細(xì)胞因子進(jìn)行檢測(cè)和分析。流式細(xì)胞術(shù)可以同時(shí)測(cè)定多個(gè)細(xì)胞因子,可以提供細(xì)致的信息。
免疫組化是一種用于定位和定量細(xì)胞因子的方法。其原理是利用特異性的抗體與細(xì)胞因子結(jié)合,然后通過(guò)染色反應(yīng)使得細(xì)胞因子在組織或細(xì)胞內(nèi)部顯示出可見(jiàn)的顏色反應(yīng)。免疫組化可以提供細(xì)胞因子在組織或細(xì)胞水平上的定位和分布情況,有助于研究其功能和作用機(jī)制。
除了免疫學(xué)細(xì)胞因子檢測(cè)方法外,分子生物學(xué)方法也被廣泛應(yīng)用于細(xì)胞因子的檢測(cè)。分子生物學(xué)方法主要通過(guò)測(cè)定相應(yīng)的核酸分子,如mrna和mirna來(lái)檢測(cè)細(xì)胞因子的表達(dá)水平。其中,實(shí)時(shí)熒光定量pcr(qpcr)是常用的分子生物學(xué)方法之一。其原理是利用特異性引物和熒光探針來(lái)擴(kuò)增和檢測(cè)細(xì)胞因子對(duì)應(yīng)的mrna分子。