紅花繼木的組織培養(yǎng)包括初代培養(yǎng)、繼代增殖培養(yǎng)和生根培養(yǎng)。組培技術在紅花繼木生產上的應用,不僅僅限于組培育苗,還有望通過組培在育種上的應用,解決種間、屬間等遠緣雜交和雜種胚停止發(fā)育的缺陷,使紅花繼木的種質資源進一步純化和提高。 1、外植體
選生長健壯、無病蟲害的紅花繼木莖尖、芽及枝等作外植體,其中外植體采集在7~8月最好,污染率較低。
2、培養(yǎng)基
紅花繼木的組織培養(yǎng)包括初代培養(yǎng)、繼代增殖培養(yǎng)和生根培養(yǎng)。試驗表明,初代培養(yǎng)和繼代增殖培養(yǎng)基可參考ms+ba1.0mg/l+iba1.0mg/l;生根培養(yǎng)基可參考1/2ms+naa1.0~1.5mg/l+0.1%的活性炭。
3、培養(yǎng)條件
紅花繼木的培養(yǎng)條件一般為:溫度20℃左右,光照時間14h/d(每天14小時),光照強度為1500lx(勒克斯)。
操作步驟
(1)外植體消毒:材料采回后,及時用稀薄的漂白粉溶液洗去材料上的污物,而后用自來水反復沖洗20分鐘,直至沖洗干凈備用。
(2)接種:在接種前,先將接種室內的紫外燈開約20分鐘進行消毒,然后打開接種臺上的鼓風機吹十分鐘左右,即可進入接種室進行接種操作。將消好毒的外植體放于超凈工作臺上,首先,在無菌條件下用70%酒精或0.01%升汞在常溫下浸泡材料消毒10分鐘,再用無菌水沖洗3~4次。然后用消毒的鑷子夾取材料置于培養(yǎng)基上進行無菌培養(yǎng)。注意接種時所用的鑷子需先在70%的酒精中消毒,并在酒精燈上燒一下再用,以求更好消毒,避免接種外植體感染。
當芽長至2厘米左右時,切取芽端接種在增殖培養(yǎng)基上分化增殖,然后將繼代增殖的叢生芽分別移至生根培養(yǎng)基中誘導生根,當根長至1~2厘米長時,從培養(yǎng)室中取出煉苗,以備移栽。
(1)繁殖速度快:從優(yōu)良母株上取下一個芽或一部分組織,理想條件下一年能繁殖幾萬到十幾萬株新的個體,所以組培技術最適合大量快速繁殖名貴和稀有植物。
(2)脫毒快繁:真菌、細菌、特別是病毒對植物的危害越來越大,已受到人們的重視,而采用植物莖尖進行組織培養(yǎng),則是一項最有效、最快捷、最實用的方法。
(3)輔助育種:組培技術是單倍體育種、遺傳性狀研究、保留種質資源的一條有效途徑。
(4)組培苗性狀一致:用組培技術繁殖的植株來自于一個親本主體,所以能夠保持后代植株具有高度的一致性和整齊度。
(5)不受親本限制:由于組培苗是采用無性繁殖技術培育植株,所以不受親本不開花、不結籽及雜交品種后代易變異等品種特性的影響,可繁殖不育、雜交品種及易變異品種。
(6)不受季節(jié)限制:組培生產采用人工光照,室內培養(yǎng),可以周年生產。
(7)節(jié)省土地和資源:由于組培生產可以在室內集中生產,立體分層生產,集中管理,能夠最大限度地節(jié)省土地、人力等,符合現代農業(yè)的發(fā)展方向。
組培技術在紅花繼木生產上的應用,不僅僅限于組培育苗,還有望通過組培在育種上的應用,解決種間、屬間等遠緣雜交和雜種胚停止發(fā)育的缺陷,使紅花繼木的種質資源進一步純化和提高。