核黃素轉(zhuǎn)運因子1(rft1)elisa試劑盒使用操作步驟:
1. 從室溫平衡 20min 后的鋁箔袋中取出所需板條,剩余板條用自封袋密封放回 4℃。
2. 設(shè)置標準品孔和樣本孔,標準品孔各加不同濃度的標準品 50μl;
3. 樣本孔中加入待測樣本 50μl;空白孔不加。
4. 棄去液體,吸水紙上拍干,每孔加滿洗滌液(350μl),靜置 1min,甩去洗滌液,吸水紙上拍干,如此重復洗板 5 次(也可用洗板機洗板)。
5. 除空白孔外,標準品孔和樣本孔中每孔加入辣根過氧化物酶(hrp)標記的檢測抗體100μl,用封板膜封住反應(yīng)孔,37℃水浴鍋或恒溫箱溫育 60min。
6. 每孔加入底物 a、b 各 50μl,37℃避光孵育 15min。
7. 每孔加入終止液 50μl,15min 內(nèi),在 450nm 波長處測定各孔的 od 值。
備注:
1. 標準品濃度依次為:80、40、20、10、5、2.5 u/l
2. 經(jīng)過大量正常標本檢驗,標本的正常濃度值均在試劑盒提供的檢測范圍內(nèi),實驗過程中直接取50μl樣本上樣即可。當有部分樣本值超過z大標準品濃度時,可用*將標本進行適當稀釋后再進行實驗。