蝴蝶蘭的組織培養(yǎng)
蝴蝶蘭屬蘭科蝴蝶蘭屬植物,其花形狀奇異清秀,花大艷麗,具有極高的觀賞價(jià)值和經(jīng)濟(jì)價(jià)值。隨著人們生活水平的不斷提高,蝴蝶蘭的市場需求量也越來越大,但蝴蝶蘭為典型的單莖性熱帶附生蘭,植物很少發(fā)生側(cè)枝,分株繁殖系數(shù)極低。其種子沒有胚乳,自然條件下很難萌發(fā),通過自身的營養(yǎng)繁殖和種子繁殖均不能滿足工廠化育苗的要求。應(yīng)用植物組織培養(yǎng)技術(shù)進(jìn)行蝴蝶蘭的快速繁殖可以縮短育苗周期,在短時(shí)間內(nèi)獲得大量成株。我們對蝴蝶蘭花梗芽組織培養(yǎng)技術(shù)進(jìn)行研究,取得了很好的效果,為工廠化育苗提供了可能。
外植體的選擇和消毒
取蝴蝶蘭花梗在自來水下用細(xì)軟毛刷輕刷表面,并吸干表面水分,剪成2一3cm長的莖段。在工作臺上按以下程序進(jìn)行滅菌處理:將材料放入經(jīng)高溫滅菌過的燒杯中;加入70%的酒精浸泡20秒;0.1%的hgcl消毒8分鐘,分2次進(jìn)行,每次4分鐘,滅菌后用無菌水沖洗5次,每次2分鐘;用解剖刀切除壞死部分后,接入培養(yǎng)基。用此方法既能有效地消毒又不會對培養(yǎng)材料產(chǎn)生毒害,培養(yǎng)材料接入培養(yǎng)基后無褐化壞死現(xiàn)象出現(xiàn)。
無菌材料的試管培養(yǎng)
培養(yǎng)材料的選擇是蝴蝶蘭組培決繁的關(guān)鍵。腋芽節(jié)位以下第3、4節(jié)花梗芽是最適宜的外植體,而谷朧甘肽200mg/l既能很好地抑制褐化,又能促進(jìn)試管苗的生長和分化,是蝴蝶蘭組織培養(yǎng)中最合適的褐化抑制劑。b5+ga32.0mg/l+naao.lmg/l是較適宜的愈傷組織誘導(dǎo)培養(yǎng)基,b5+6ba1.0mg/l+naao.2mg/l是較適宜的分化培養(yǎng)基,1/2ms+iba1.2mg/l+naa0.05mg/l及2%蔗糖是較適宜的生根培養(yǎng)基。
將消毒后的無菌培養(yǎng)材料接種在愈傷組織誘導(dǎo)培養(yǎng)基上,其培養(yǎng)基為b5+ga32.0mg/l+naao.lmg/l,培養(yǎng)基ph調(diào)至5.8,培養(yǎng)室溫度控制在24士2℃。接種后遮光放置4一5天,而后每天光照12小時(shí),2周后,切口處開始膨大,產(chǎn)生淡綠色瘤狀愈傷組織,并不斷增大。4周后將愈傷組織切下轉(zhuǎn)接到分化培養(yǎng)基b5+6ba1.0mg/l+naa0.2mg/l上,轉(zhuǎn)瓶后愈傷組織的體積和重量成指數(shù)級增加,4周左右愈傷組織表面出現(xiàn)較大綠色顆粒,并形成芽點(diǎn),繼而分化出叢生芽。分化時(shí)出現(xiàn)褐化現(xiàn)象,可加入20omg幾谷朧甘膚解除。當(dāng)叢生苗長到3一4cm、具有4一5片葉時(shí),將其移到生根培養(yǎng)基1/2ms+iba1.2mg/l十naao.05mg/l2%蔗糖上,10天后切口基部開始出現(xiàn)白色的根狀突起,25天后,每株生根4條以上,生根率為95%以上。
試管苗的煉苗移栽
試管苗移栽前需要有煉苗的過程,移栽前5天左右,在室內(nèi)將封口膜打開1/3左右,使幼苗與空氣有一定接觸。2天后,移栽到馴化溫室內(nèi),使幼苗完全暴露在空氣中,要適當(dāng)遮陽,避免高溫和強(qiáng)光直接照射,3天后即可移栽。移栽時(shí)將幼苗取出,放在1000倍的多菌靈水溶液中小心洗去根部的培養(yǎng)基,去掉老葉,放入鋪有濕報(bào)紙的盒子,要注意保濕。栽培基質(zhì)為經(jīng)過高溫消毒后的苔鮮,用鑷子劃痕后,夾住幼苗根部,插入至第1輪葉,用手小心壓緊,用薄膜覆蓋,保持溫度在21一25℃,相對濕度60%一80%,控制好水分和溫度,移栽成活率可達(dá)90%以上。當(dāng)新葉長出、新根伸長時(shí),每周用0.3%一0.5%磷酸二氫鉀進(jìn)行葉面施肥1次,成苗率達(dá)80%以上。
來自:園林網(wǎng)