簡單的說,pcr就是利用dna聚合酶對特定基因做體外或試管內(nèi)in vitro的大量合成,基本上它是利用dna聚合酶進(jìn)行專一性的連鎖復(fù)制。目前常用的技術(shù),可以將一段基因復(fù)制為原來的一百億至一千億倍。根據(jù)dna擴(kuò)增的目的和檢測的標(biāo)準(zhǔn),可以將pcr儀分為普通pcr儀,梯度pcr儀,原位pcr儀,實時熒光定量pcr儀四類。
pcr儀利用升溫使dna變性,在聚合酶的作用下使單鏈復(fù)制成雙鏈,進(jìn)而達(dá)到基因復(fù)制的目的。
維護(hù)保養(yǎng)措施有哪些?
1、儀器安置
儀器應(yīng)安放在濕度較低、灰塵較少并遠(yuǎn)離水源和熱源的地方,無腐蝕性氣體或強(qiáng)磁場干擾。
環(huán)境溫度建議在18~35℃之間。儀器之間應(yīng)保持50cm 以上距離,降低儀器之間的影響。
2、樣品臺、熱蓋定期清潔
用95%乙醇配合棉簽、無塵布等工具,清潔樣品臺。之后運行pcr儀,設(shè)定保持溫度為50℃,約5~10min,讓殘余液體揮發(fā)去除。
另外,熱蓋也應(yīng)該用酒精或純水定期清洗,確保熱蓋清潔,溫控性能良好。對于熒光定量pcr,清潔樣品臺和熱蓋的同時,去除灰塵等雜物,保證光路清潔,降低信號干擾。
3. 使用前預(yù)熱
老款的pcr儀的性能比不上新款儀器,使用前需要進(jìn)行預(yù)熱,不僅對儀器維護(hù)有好處,還能節(jié)約實驗時間。新款的儀器升溫快,但還是建議最好能在進(jìn)行實驗前預(yù)熱2min,這樣可以有效延長儀器的使用壽命。
4. 定期運行維護(hù)
pcr儀器使用頻率較低的情況下,需要在儀器關(guān)閉1小時后用軟布或塑料紙覆蓋以防止灰塵進(jìn)入。儀器如果長期不使用,需要至少每隔半個月進(jìn)行一次開機(jī)自檢,運行20min左右。